免疫細(xì)胞療法是指利用人體的免疫細(xì)胞作為“活藥物”來治療癌癥，與傳統(tǒng)藥物不同，免疫細(xì)胞治療產(chǎn)品目前大多數(shù)是定制的，需要先進(jìn)的制造技術(shù)。近期，中國科學(xué)院上海營養(yǎng)與健康研究所上海生命科學(xué)信息中心的研究者發(fā)表在《sage》期刊的一篇題為：“The Progress and Prospects of Immune Cell Therapy for the Treatment of Cancer”的文章中，總結(jié)了免疫細(xì)胞治療癌癥的最新進(jìn)展。

免疫細(xì)胞療法的反應(yīng)通常涉及多種免疫細(xì)胞類型的激活和協(xié)作，包括抗原呈遞細(xì)胞，例如樹突狀細(xì)胞 (DC) 和巨噬細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞 (T細(xì)胞) 和自然殺傷 (NK) 細(xì)胞。腫瘤負(fù)擔(dān)下的免疫系統(tǒng)不僅免疫細(xì)胞數(shù)量失衡，而且調(diào)節(jié)抗癌免疫反應(yīng)的分子和信號通路也表現(xiàn)出功能異常。

嵌合抗原受體 (CAR)-T 細(xì)胞療法在血液系統(tǒng)惡性腫瘤治療方面?zhèn)涫荜P(guān)注，但它們在治療實(shí)體腫瘤方面的療效有限。腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞 (TIL) 細(xì)胞療法、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞 (CIK) 療法、樹突狀細(xì)胞 (DC) 疫苗和 DC/CIK 細(xì)胞療法旨在利用人體的天然防御機(jī)制來靶向和消滅癌細(xì)胞，這些免疫細(xì)胞療法的副作用或風(fēng)險(xiǎn)較少。

另一方面，如嵌合抗原受體-T（CAR-T）細(xì)胞、T細(xì)胞受體（TCR）-T、嵌合抗原受體-自然殺傷（CAR-NK）或CAR-巨噬細(xì)胞（CAR-M），都是利用自體干細(xì)胞、同種異體或異種細(xì)胞或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞，需要更高的操作水平。

抗癌療法的進(jìn)化跨越了一百多年的時(shí)間，在消除癌細(xì)胞的同時(shí)對健康組織的損害降到最低的療法不斷發(fā)展。2017年，美國食品藥品監(jiān)督管理局 (FDA) 批準(zhǔn)了兩種嵌合抗原受體T (CAR-T) 細(xì)胞療法，即Kite Pharm的axicabtagene ciloleucel (Yescarta) 和諾華的 tisagenlecleucel (Kymriah) ，這也是抗癌療法的重要里程碑。

常見的免疫細(xì)胞療法治療癌癥進(jìn)展

TIL細(xì)胞治療

TIL是實(shí)體腫瘤微環(huán)境 (TME) 中發(fā)現(xiàn)的天然單核細(xì)胞，包括腫瘤內(nèi)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞 (iTIL) 和基質(zhì)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞 (sTIL)。sTIL主要為效應(yīng)記憶T細(xì)胞，與iTIL 相比更容易檢測到。作為一組暴露于腫瘤組織的異質(zhì)性淋巴細(xì)胞，TIL經(jīng)過“預(yù)先訓(xùn)練”以攻擊癌細(xì)胞，而不會攻擊健康細(xì)胞。在小鼠腫瘤模型中，這些異質(zhì)性細(xì)胞顯示出治療晚期癌癥的潛力，并且首個(gè)人類TIL療法使轉(zhuǎn)移性黑色素瘤顯著消退。

實(shí)體瘤缺乏理想的腫瘤標(biāo)志物，使得腫瘤相關(guān)抗原 (TAA) 的選擇具有挑戰(zhàn)性。與基因改造的免疫細(xì)胞相比，TIL 在治療實(shí)體腫瘤，尤其是黑色素瘤等高度異質(zhì)性的腫瘤方面表現(xiàn)出獨(dú)特的優(yōu)勢。此外，它們具有對注射后向TME遷移至關(guān)重要的趨化因子受體，與CAR-T細(xì)胞相比，它們的脫靶毒性較低，這歸因于T細(xì)胞成熟過程中的負(fù)選擇。

自從1988年Rosenberg 等人成功將TIL療法應(yīng)用于轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者以來，一系列臨床試驗(yàn)應(yīng)運(yùn)而生。1996年，TIL療法首次在一項(xiàng)涉及113名患者的臨床研究中用于治療非小細(xì)胞肺癌 (NSCLC) 。結(jié)果顯示，TIL聯(lián)合IL-2可有效治療NSCLC，并且與II期或IIIa期NSCLC相比，對IIIb期NSCLC具有選擇性獲益。

TIL與IL-2過繼免疫治療聯(lián)合術(shù)后及傳統(tǒng)治療的非小細(xì)胞肺癌的隨機(jī)試驗(yàn)

在取得初步成功之后，TIL療法的繼續(xù)向其他類型癌癥擴(kuò)展，包括皮膚癌、腎癌和胃癌。這些發(fā)展中的具體方法旨在闡明 TIL細(xì)胞類型的組成及其與臨床結(jié)果的相關(guān)性。例如，研究發(fā)現(xiàn)，成功生成腫瘤浸潤B淋巴細(xì)胞（TIB）可預(yù)測轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌（mRCC）患者的臨床預(yù)后。另一項(xiàng)關(guān)于胃癌TIL治療的研究顯示，TIL的組織學(xué)亞群與不同的生存時(shí)間相關(guān)。目前，TIL治療的臨床轉(zhuǎn)移仍處于初步階段，缺乏長期臨床觀察。但初步成功表明有機(jī)會開發(fā)有前景的治療性TIL，采用更有效的分離和擴(kuò)增方法，并有望與其他抗腫瘤療法進(jìn)行替代和組合。

CIK 細(xì)胞治療

CIK細(xì)胞是具有混合T細(xì)胞和NK細(xì)胞表型的異質(zhì)性免疫效應(yīng)細(xì)胞，由人PBMC或臍帶血單核細(xì)胞與干擾素γ（IFN-γ）、抗CD3抗體、重組人IL-1和IL-2在體外孵育而產(chǎn)生。CIK細(xì)胞不受主要組織相容性復(fù)合體（MHC）限制的腫瘤靶向性，適合同種異體使用，并且能夠殺傷各種類型的腫瘤。在體外培養(yǎng)過程中，CIK細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，激活巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的細(xì)胞毒活性，從而直接抑制腫瘤細(xì)胞的生長并促進(jìn)間接殺傷作用。

活化的CIK細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，包括IL-2、IL-6、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）等細(xì)胞因子，不僅直接增強(qiáng)細(xì)胞毒作用、抑制腫瘤細(xì)胞，還能通過調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)間接殺傷腫瘤細(xì)胞。CIK細(xì)胞大量產(chǎn)生的IFN-γ，能增強(qiáng)NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）的活性，還能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞上MHC-I類分子的表達(dá)，從而增強(qiáng)CTL的殺傷力。

自1991 年推出CIK細(xì)胞療法以來，已有超過 5,000 名患有不同腫瘤類型的患者（包括肺癌、乳腺癌、腦癌和結(jié)腸癌）參與了CIK細(xì)胞療法的臨床研究。全球CIK細(xì)胞（或CIK細(xì)胞與樹突狀細(xì)胞結(jié)合）的臨床試驗(yàn)已超過80個(gè)。CIK細(xì)胞的治療潛力不僅限于與NKG2D 的相互作用，還結(jié)合了抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用 (ADCC) 。與其他免疫療法、常規(guī)化療或放射療法一起，CIK療法顯示出協(xié)同抗腫瘤作用。

腫瘤疫苗

操縱患者自體樹突狀細(xì)胞進(jìn)行“接種”以對抗腫瘤是一種很有前景的方法。樹突狀細(xì)胞疫苗涉及用TAA（如肽、蛋白質(zhì)、DNA/RNA 或病毒）處理體外培養(yǎng)的樹突狀細(xì)胞。樹突狀細(xì)胞將吸收抗原，然后在精心控制的培養(yǎng)過程中活躍起來。樹突狀細(xì)胞是強(qiáng)大的抗原呈遞細(xì)胞，在影響免疫系統(tǒng)方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。

DC疫苗通常采用體外成熟并被抗原脈沖的自體單核細(xì)胞，已在各種腫瘤患者中表現(xiàn)出良好的耐受性，且毒性極小。然而，抗原特異性免疫反應(yīng)的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間通常較弱，限制了客觀的臨床反應(yīng)。

Sipuleucel-T 是唯一獲得FDA批準(zhǔn)的自體DC疫苗，它為有效治療成人惡性腫瘤帶來了希望。用重組蛋白 (PAP-GM-CSF) 培養(yǎng)患者的PBMCs制成的DC疫苗，有效的改善成人和兒童惡性腫瘤的預(yù)后。在臨床試驗(yàn)中，DC主要用于與CIK細(xì)胞聯(lián)合免疫療法，以及聯(lián)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑 (ICI) 和化療、放療以改善預(yù)后。研究表明DC能夠激活自然殺傷T (NKT) 細(xì)胞或同時(shí)激活 CD4+和CD8+T細(xì)胞。

與安慰劑相比，sipuleucel-T 治療的主要療效分析結(jié)果,Copyright ? 2010 Massachusetts Medical Society

DC/CIK細(xì)胞治療

當(dāng)多種低風(fēng)險(xiǎn)免疫細(xì)胞療法聯(lián)合使用時(shí)，可以產(chǎn)生積極的聯(lián)合協(xié)同效應(yīng)，尤其在DC和CIK的聯(lián)合應(yīng)用上，可以發(fā)揮協(xié)同效應(yīng)，增強(qiáng)機(jī)體對疾病的免疫反應(yīng)。

CIK細(xì)胞以其廣譜的腫瘤殺傷作用而聞名，但由于缺乏特異性的識別能力而受到限制。樹突狀細(xì)胞 (DC) 是目前所知的最有效的抗原呈遞細(xì)胞，研究表明CIK和樹突狀細(xì)胞之間的相互作用會誘導(dǎo)兩個(gè)細(xì)胞群中免疫刺激表面分子表達(dá)的改變。DC與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)起著互補(bǔ)的作用，相互促進(jìn)成熟，共同提高抗腫瘤活性，并表現(xiàn)出良好的協(xié)同作用。

DC/CIK細(xì)胞療法以其相互適應(yīng)、協(xié)同作用的特點(diǎn)，成為近年來腫瘤治療領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)?；A(chǔ)研究和臨床研究均迅速發(fā)展，并證明其能顯著增強(qiáng)抗腫瘤免疫力。盡管有輕微的移植物抗宿主?。?nbsp;GvHD）的擔(dān)憂，但臨床試驗(yàn)表明療效可控。

腎癌患者對 gmDCs-CIK 治療的臨床反應(yīng)。

案例研究證明了其安全性和更高的療效。DC /CIK細(xì)胞療法針對免疫系統(tǒng)的各個(gè)方面，從而提供更全面的抗病方法。這在病情復(fù)雜或難治性惡性腫瘤中尤其有益，因?yàn)樵趷盒阅[瘤中，多種免疫功能障礙共同發(fā)揮作用。

高技術(shù)壁壘免疫細(xì)胞療法的技術(shù)進(jìn)展

高技術(shù)壁壘免疫細(xì)胞療法利用自體干細(xì)胞、同種異體或異種異體細(xì)胞或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞，包括 CAR-T、T 細(xì)胞受體-T (TCR-T)、CAR-NK 和 CAR-巨噬細(xì)胞 (CAR-M)。

CAR是一種經(jīng)過改造的受體蛋白，它為免疫細(xì)胞提供了一種識別癌細(xì)胞表面特定抗原的新能力，從而激發(fā)免疫細(xì)胞消滅癌細(xì)胞。目前的研究表明，即使對CAR結(jié)構(gòu)進(jìn)行微小的修改也會顯著影響治療結(jié)果。裝甲CAR（圖1F）旨在分泌細(xì)胞因子或其他分子，有助于抵消腫瘤微環(huán)境（TME）的免疫抑制性質(zhì)，從而可能提高CAR工程細(xì)胞的持久性和功效。

CAR-T免疫細(xì)胞已從靶向單一抗原發(fā)展到靶向兩種不同的抗原，以優(yōu)化癌細(xì)胞逃逸或復(fù)發(fā)丟失抗原，并且與任一抗原結(jié)合都會觸發(fā)CAR-T免疫細(xì)胞的激活。臨床研究表明 CD19/CD22 共轉(zhuǎn)導(dǎo) CAR-T細(xì)胞和CD19/ CD22雙特異性CAR-T細(xì)胞具有顯著療效。同樣，I 期臨床試驗(yàn)表明，雙特異性 CD20/CD19 CAR-T 也可用于治療復(fù)發(fā)和難治性B細(xì)胞惡性腫瘤患者，治療28天后總體有效率達(dá)82%，表明對于治療既安全又有效。

迄今為止，大多數(shù)涉及 CAR-NK 細(xì)胞的研究都使用了最初用于T細(xì)胞的CAR構(gòu)建體。已經(jīng)開發(fā)出具有整合了CD28 或 4-1BB 共刺激結(jié)構(gòu)域的CAR構(gòu)建體的第二代CAR-NK。最近的研究報(bào)告稱，具有含有4-1BB和CD3ζ的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的CAR-NK可克服抑制信號并誘導(dǎo)NK細(xì)胞特異性，從而殺死CD19+ aALL細(xì)胞。CAR-NK細(xì)胞研究主要處于臨床前及早期臨床試驗(yàn)階段，臨床試驗(yàn)報(bào)道較少。不過，通用同種異體CAR-NK細(xì)胞在腫瘤治療中仍有巨大潛力。

CAR-M細(xì)胞與CAR-T細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和代數(shù)相同，但胞內(nèi)信號結(jié)構(gòu)域的功能不同，主要起到增強(qiáng)吞噬作用。CAR-M細(xì)胞能夠直接利用CD3ζ胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域傳遞吞噬信號，F(xiàn)cRγ和多個(gè)表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白（Megf10）也可作為胞內(nèi)信號結(jié)構(gòu)域。

發(fā)表在Oncline上有關(guān)CAR-M的相關(guān)報(bào)道

CAR -M的首個(gè)臨床試驗(yàn)為第一代產(chǎn)品，其胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域?yàn)镃D3ζ88 ， I期臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示出良好的初始安全性和有效性，并獲得FDA快速通道認(rèn)證。目前CAR-M主要為自體治療，但已出現(xiàn)“現(xiàn)成的”同種異體CAR-M并正在進(jìn)一步研究中。

圖1 . CAR 的設(shè)計(jì)策略。針對腫瘤而設(shè)計(jì)的 CAR 示意圖。

γδT 細(xì)胞表達(dá)TCRγδ并以HLA非依賴性方式識別惡性細(xì)胞。它不需要消除TCR表達(dá)或信號傳導(dǎo)，并且GvHD較低或不存在風(fēng)險(xiǎn)。研究表明，γδCAR-T細(xì)胞表現(xiàn)出與傳統(tǒng)αβCAR-T細(xì)胞相似或更大的細(xì)胞毒作用，且在體內(nèi)未觀察到GvHD 。然而，它們在體外的細(xì)胞毒能力持續(xù)時(shí)間較短。此外，抗CD20γδCAR-T 細(xì)胞在B 細(xì)胞淋巴瘤動物模型中產(chǎn)生了有希望的結(jié)果，目前正在進(jìn)行 I 期臨床試驗(yàn)。

NKT 細(xì)胞也稱為CD1d 限制性T細(xì)胞，具有T細(xì)胞和NK細(xì)胞的特征。這些細(xì)胞主要識別非多態(tài)性CD1d 分子，這是一種抗原呈遞分子，可與自身和外來脂質(zhì)以及糖脂結(jié)合。I型NKT或iNKT細(xì)胞缺乏HLA 限制，可作為通用供體細(xì)胞發(fā)揮作用，但其在體內(nèi)的持久性仍不清楚。研究表明，CAR19-iNKT細(xì)胞表現(xiàn)出抗淋巴瘤活性和較強(qiáng)的消除腦淋巴瘤的能力。另一種同種異體NKT表達(dá)抗CD19嵌合受體與CD28和IL-15，目前正在針對復(fù)發(fā)或難治性B細(xì)胞惡性腫瘤患者進(jìn)行臨床試驗(yàn)（NCT03774654）。

臨床研究進(jìn)展

自2017年FDA批準(zhǔn)首個(gè)CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品以來，全球已有10個(gè)CAR-T產(chǎn)品陸續(xù)獲批。CAR-T、CAR-NK、TCR-T療法的臨床研究自2013年以來迅速增加，2022年CAR-T細(xì)胞療法數(shù)量達(dá)到258例，需要注意的是2023年的數(shù)據(jù)為1月至10月（圖2A）。從國家來看，高風(fēng)險(xiǎn)細(xì)胞療法的臨床研究主要分布在美國和中國，占全球研究的80%以上（圖2B）。CAR-T療法的主要臨床治療靶點(diǎn)是CD19、CD22、CD20和B細(xì)胞成熟抗原（BCMA）。在血液腫瘤中，增長最快的適應(yīng)癥是淋巴瘤和骨髓瘤。

圖2:CAR-T、TCR-T 和 CAR-NK 療法的臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。(A) 2018 年至 2023 年細(xì)胞療法臨床研究數(shù)量，分為 CAR-T、TCR-T 和 CAR-NK。(B) 按國家/地區(qū)劃分的細(xì)胞療法臨床研究數(shù)量，分為 CAR-T、TCR-T 和 CAR-NK。(C) 細(xì)胞療法藥物在適應(yīng)癥方面的臨床進(jìn)展，細(xì)胞療法藥物分組與 (A) 相同，適應(yīng)癥分為液體和實(shí)體腫瘤。

目前TCR-T已有1個(gè)治療產(chǎn)品上市，用于轉(zhuǎn)移性葡萄膜黑色素瘤?？傮w而言，TCR-T在實(shí)體瘤中的進(jìn)展速度往往快于血液腫瘤（圖2C），TCR-T的靶抗原主要集中在MART-1、HPV16-E6、NYESO、HPV16-E7等。從病癥來看，TCR-T的臨床研究主要應(yīng)用于實(shí)體瘤的治療，這些實(shí)體瘤大多與病毒感染有關(guān)，例如宮頸癌就與人乳頭瘤病毒（HPV）感染有關(guān)，此外，TCR-T在頭頸部、肝臟、結(jié)腸等癌癥的臨床研究進(jìn)展迅速（圖2C）。在CAR-NK病癥方面，血液腫瘤仍然是進(jìn)展最快的，其中淋巴瘤病癥進(jìn)展更快（圖2C）。CAR-NK臨床治療靶點(diǎn)主要針對血液腫瘤的CD19、CD22、BCMA，以及實(shí)體腫瘤的PSMA、HER2、ROBO1、MUC1191 。整體來看，TCR-T和CAR-NK仍處于臨床早期階段。目前CAR-M的臨床研究尚處于起步階段，僅有1項(xiàng)I期臨床試驗(yàn)（NCT04660929）。

CAR-巨噬細(xì)胞用于治療 高表達(dá)HER2的實(shí)體腫瘤

結(jié)論

免疫細(xì)胞療法在腫瘤治療中的重要性日益凸顯。當(dāng)作為某些癌癥的獨(dú)立治療方法時(shí)，免疫細(xì)胞療法，特別是過繼性T細(xì)胞轉(zhuǎn)移療法，在白血病和淋巴瘤等血液系統(tǒng)惡性腫瘤中表現(xiàn)出顯著的成效。然而，由于諸如免疫抑制性 TME、腫瘤異質(zhì)性、靶抗原表達(dá)低等因素，一些實(shí)體腫瘤單獨(dú)使用免疫細(xì)胞療法已被證明更具挑戰(zhàn)性。在許多情況下，換用另一種免疫細(xì)胞療法或將免疫細(xì)胞療法與其他治療策略（如化療、放射療法、其他免疫療法或靶向療法）相結(jié)合被認(rèn)為是有益的，并且可能提高整體的治療效果。

目前全球已有10個(gè)CAR-T產(chǎn)品獲批，DC疫苗和TCR-T僅有1個(gè)獲批。在免疫細(xì)胞治療方面，TILs和DC疫苗均有望用于治療實(shí)體瘤，此外CIK療法與其他免疫策略聯(lián)合使用，具有協(xié)同抗腫瘤作用。這些方法通常由功能特征各異的異質(zhì)性細(xì)胞組成，在治療異質(zhì)性相對較高的惡性腫瘤方面具有優(yōu)勢。

另一方面，高技術(shù)壁壘免疫細(xì)胞療法，如CAR-T和TCR-T，通常具有靶向性和高度特異性，特別適用于相對快速增殖的惡性腫瘤。在血液腫瘤中，CAR-T和TCR-T已經(jīng)得到臨床驗(yàn)證，其在治療實(shí)體瘤方面的應(yīng)用正在穩(wěn)步推進(jìn)。而CAR-NK和CAR-M基于其生物學(xué)特性，在治療實(shí)體瘤方面具有先天優(yōu)勢。TCR-T專注于特定的TAA和新抗原，使其對外來抗原（例如病毒相關(guān)的惡性腫瘤）有益。

總體來看，免疫細(xì)胞治療技術(shù)壁壘較高，創(chuàng)新驅(qū)動力強(qiáng)，技術(shù)發(fā)展多樣，近年來進(jìn)展呈現(xiàn)爆發(fā)式增長。筆者認(rèn)為，快速的技術(shù)創(chuàng)新將促進(jìn)這些高效的癌癥治療方法的發(fā)展，也將顯著改善腫瘤的治療效果并促進(jìn)人類健康。