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詹姆斯·羅斯曼，這位諾貝爾獎得主，曾預(yù)見性地宣稱：“21世紀(jì)是細(xì)胞治療的時代?！备杉?xì)胞治療無疑已成為未來醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的璀璨新星。

在當(dāng)前的醫(yī)學(xué)研究中，干細(xì)胞技術(shù)因其巨大的潛力和創(chuàng)新性而備受矚目。但要確保其在臨床應(yīng)用中能真正造?；颊?，關(guān)鍵在于干細(xì)胞的質(zhì)量。

那么，究竟何為“高質(zhì)量”的干細(xì)胞？這一標(biāo)準(zhǔn)又是如何界定的呢？它依賴于哪些關(guān)鍵因素呢？

細(xì)胞的來源是評估其質(zhì)量的首要考量因素。不同的來源可能帶來遺傳特性、穩(wěn)定性以及功能表達(dá)的差異。因此，在干細(xì)胞的選擇上，必須審慎評估其來源的質(zhì)量和適用性，以確保所選細(xì)胞具備較高的治療潛力。

值得注意的是，人體細(xì)胞的活力隨著年齡的增長而逐漸衰退。無論是選擇異體回輸還是自體細(xì)胞，供者的年齡和整體健康狀況都會直接影響細(xì)胞的質(zhì)量。

以2019年英國利茲大學(xué)的研究為例，科研團(tuán)隊從19至89歲的67名健康供體中采集了骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，并通過體外培養(yǎng)實驗證實：年輕人的干細(xì)胞不僅數(shù)量更多，而且其增殖能力也顯著高于老年人。[2]這一發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了年齡因素在細(xì)胞質(zhì)量評估中的重要性。

△培養(yǎng)基中培養(yǎng)14天后，年輕組（19-40），中年齡組（41-60）和老年組（61-89歲）的干細(xì)胞計數(shù)對比

△年輕態(tài)的干細(xì)胞胞體飽滿、呈明顯的梭形；衰老的干細(xì)胞胞體寬大扁平

此外，多種疾病同樣會對自體間充質(zhì)干細(xì)胞的功能和效果產(chǎn)生不利影響，包括遺傳性疾病、自身免疫性疾病以及一些慢性疾病。

以糖尿病為例，2021年9月《干細(xì)胞轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)》期刊上的一項研究明確指出：長期患有2型糖尿病的患者，其干細(xì)胞的增殖能力、免疫抑制潛力以及存活率均會受到顯著抑制。[3]這一發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了疾病狀態(tài)對干細(xì)胞質(zhì)量的影響。

健康組（第1組）和2型糖尿病患者的自體骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-MSCs）的表征對比（糖尿病持續(xù)時間：第2組：<5年，組3：5-10年，第4組：>10年）

盡管干細(xì)胞治療在2型糖尿病領(lǐng)域展現(xiàn)出潛在的治療價值，但一些糖尿病患者在使用自體干細(xì)胞治療時卻得到了不盡如人意的結(jié)果。這主要是因為疾病狀態(tài)改變了患者自體干細(xì)胞的分子和細(xì)胞特征，特別是影響了其代謝活動和線粒體DNA的結(jié)構(gòu)。

鑒于年齡和供體狀況的重要性，年輕且健康的自體干細(xì)胞無疑為細(xì)胞療法提供了更為理想的選擇。這樣的干細(xì)胞不僅具有更高的活力和增殖能力，而且其遺傳穩(wěn)定性和功能表達(dá)也更為優(yōu)越。

在評估干細(xì)胞質(zhì)量時，細(xì)胞的活率和生長活性是兩個至關(guān)重要的指標(biāo)。高活率的細(xì)胞在移植后更有可能成功存活并發(fā)揮其預(yù)期功能，而生長活性則直接關(guān)聯(lián)著細(xì)胞的增殖和分化能力。因此，為了確保干細(xì)胞在體內(nèi)能夠高效實現(xiàn)治療目標(biāo)，選擇具有高活率和活性的干細(xì)胞至關(guān)重要。

干細(xì)胞回輸至體內(nèi)時，其活性直接關(guān)系到修復(fù)或治療的效果。只有活細(xì)胞才能有效發(fā)揮作用，而死細(xì)胞不僅無效，還可能帶來機(jī)體的毒性反應(yīng)。因此，細(xì)胞活率不僅關(guān)乎治療效果，更涉及患者的安全。為此，國內(nèi)對干細(xì)胞產(chǎn)品的活率有嚴(yán)格的要求，新鮮細(xì)胞制劑的活率需達(dá)90%以上，而凍存細(xì)胞制劑則需保持70%以上的活率。

除了干細(xì)胞本身的活性，其存儲和運輸條件也至關(guān)重要。不合格的存儲或運輸條件可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡、細(xì)胞膜破裂及內(nèi)容物釋放，這不僅會削弱治療效果，還可能增加不良事件的發(fā)生風(fēng)險。此外，細(xì)胞的移植方式同樣影響細(xì)胞活率，如輸注移植速度過慢、耗時過長，都可能增加細(xì)胞死亡的風(fēng)險，從而提高不良事件發(fā)生的可能性。

細(xì)胞生長活性的評定涉及多個標(biāo)準(zhǔn)，如細(xì)胞倍增時間、細(xì)胞周期、克隆形成率和端粒酶活性等。這些指標(biāo)均受到“細(xì)胞代次”的顯著影響。

細(xì)胞代次指的是干細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中的傳代次數(shù)。通常，從臍帶、胎盤、羊膜等組織中提取的干細(xì)胞被稱為原始P0代，經(jīng)過一次傳代后即為P1代干細(xì)胞，以此類推。然而，隨著傳代次數(shù)的增加，干細(xì)胞的生物學(xué)效力和增殖特性會逐漸降低，這是一個關(guān)鍵且不可忽視的特性。

△圖a代表P3代，圖b代表P8代

根據(jù)研究，細(xì)胞代次并非越低越好，而是存在一個合適的范圍。從干細(xì)胞生長曲線的檢測數(shù)據(jù)來看，P4至P7代的細(xì)胞生長活性依然保持在較高水平，與P0至P3代之間并未形成顯著差距。特別是在間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）的臨床應(yīng)用中，4至8代的細(xì)胞被認(rèn)為是最佳的選擇，這一結(jié)論得到了文獻(xiàn)理論的支持。

該研究表明，盡管高代次培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）在染色體組型上依然保持穩(wěn)定，但到第8代時其端粒酶活性出現(xiàn)一定程度的下降。進(jìn)一步檢測人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶活性亞單位基因的表達(dá)后發(fā)現(xiàn)，第5、10和20代MSCs的端粒酶活性并未呈現(xiàn)顯著性差異。這些不同代次的細(xì)胞展現(xiàn)出相似的生長增殖曲線，說明它們的細(xì)胞增殖活力在代次間并未顯示出明顯的差異性。

鑒于過度的傳代培養(yǎng)會導(dǎo)致間充質(zhì)干細(xì)胞出現(xiàn)老化征象，建議用于臨床應(yīng)用的間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)最好不超過第10代。

在評估高質(zhì)量細(xì)胞時，值得特別關(guān)注的是，干細(xì)胞的使用劑量并非簡單追求數(shù)量，而是存在一個有效的劑量范圍，即在某一范圍內(nèi)，療效才能達(dá)到最佳。

2019年，《SCTM CELLS》期刊上發(fā)表的一項研究“2004-2018年間充質(zhì)干細(xì)胞臨床試驗趨勢”便驗證了這一點，研究指出干細(xì)胞回輸存在明確的有效劑量范圍，過量使用并不一定能帶來更好的療效。

美國羅格斯大學(xué)干細(xì)胞研究中心的科學(xué)家們深入分析了過去14年間的28項干細(xì)胞臨床實驗，這些實驗涉及不同的干細(xì)胞劑量，旨在探究是否存在一個獨立于其他變量的有效劑量范圍。

經(jīng)過仔細(xì)統(tǒng)計和分析，結(jié)果顯示在16項靜脈注射的實驗中，有14項實驗的有效劑量集中在7000萬至1.9億細(xì)胞之間。當(dāng)劑量低于7000萬細(xì)胞時，實驗通常顯示治療效果不佳；而當(dāng)劑量超過1.9億細(xì)胞時，治療效果不僅不會提升，反而可能出現(xiàn)下降，并伴隨更高的不良反應(yīng)風(fēng)險。這一發(fā)現(xiàn)也在3個關(guān)節(jié)腔注射實驗中得到了驗證，此時干細(xì)胞的有效劑量范圍降至5000萬至1億細(xì)胞。同樣地，當(dāng)注射劑量過低（如1000萬細(xì)胞）或過高（如2億細(xì)胞）時，治療效果也會顯著降低。

所有這些數(shù)據(jù)都強(qiáng)烈指向一個結(jié)論：干細(xì)胞治療確實存在有效劑量范圍。研究者還發(fā)現(xiàn)，干細(xì)胞劑量與療效之間的關(guān)系呈現(xiàn)出一個倒U型曲線，即在一定范圍內(nèi)增加劑量會提高治療效果，但超過某個最佳劑量點后，繼續(xù)增加劑量反而可能導(dǎo)致療效下降和不良反應(yīng)增加。

干細(xì)胞技術(shù)，作為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的前沿領(lǐng)域，需要我們以更全面、更理性的視角去審慎對待。我們必須嚴(yán)格遵守干細(xì)胞臨床應(yīng)用的相關(guān)指導(dǎo)原則和標(biāo)準(zhǔn)，以確保能夠從中獲得預(yù)期的治療效果。

近年來，我國也在不斷加強(qiáng)干細(xì)胞療法相關(guān)政策和法規(guī)的完善，旨在為干細(xì)胞療法的發(fā)展創(chuàng)造一個更加有利的環(huán)境和保障。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和規(guī)范化標(biāo)準(zhǔn)的逐步確立，我們有理由相信，我國干細(xì)胞臨床研究和應(yīng)用將步入更加規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化的快速發(fā)展軌道。